抗体药物，包括单克隆抗体、双特异性抗体、抗体片段、抗体偶联药物以及抗体融合蛋白等，因其靶向性强、特异性高以及毒副作用小等优势，在自身免疫疾病与抗肿瘤治疗领域发挥着重要作用。面对不断增长的市场需求，开发新型抗体药物及优化下游生产工艺，具有显著的经济与社会价值。

抗体纯化过程较为复杂，需要结合多种分离手段设计合理的纯化流程，以高效获取高质量的抗体产品。抗体下游工艺通常包括以下步骤：

1. 细胞澄清收获

通过离心和过滤等方法去除细胞及其碎片，以获得清澈的发酵液。

2. 亲和捕获

使用Protein A亲和层析捕获抗体。这种方法源自金黄色葡萄球菌，能特异性结合IgG Fc片段，通常仅需一步即可达到90%以上的纯度，特别适用于捕获人源抗体（非IgG3）及FC融合蛋白，是捕获抗体蛋白的最有效手段。

3. 低pH孵育

在该步骤中，低pH环境有效降低病毒的量，通常可减少7-8 log，随后仅需1-2步纯化即可完成整个抗体的提纯。

4. 中间纯化与精纯

在这一阶段，进一步去除宿主蛋白、宿主DNA、聚集体、抗体片段、内毒素及脱落的Protein A等过程相关杂质。常用的层析手段包括离子交换层析与疏水层析。

5. 离子交换层析

此方法依据抗体与杂质间的带电性差异进行分离。其中，阴离子交换层析常采用流穿模式去除内毒素、病毒及重组宿主杂质，而阳离子交换层析则通过结合洗脱模式在酸性条件下有效去除杂质，去除效果显著。特别是一些高分辨率、高选择性的阳离子交换层析介质如MegaPolyBXS、DiamondCD-S及DiamondSPMustang，均能显著去除聚集体及宿主蛋白HCP。

6. 疏水层析

疏水层析与离子交换层析相辅相成，主要用于去除抗体聚集体与HCP。HIC介质的疏水性对收率和杂质去除效果具有显著影响，因此选择合适的配基是实现纯化的关键。常见的疏水作用层析配基的疏水性强弱依次为：Butyl-S＜Butyl＜Octyl＜Phenyl。

此外，像DiamondMMC与DiamondMIX-A等兼具疏水性与离子交换的多模式填料日益受到关注，这些新型混合模式介质具有优异的去除宿主蛋白、脱落配基及多聚体等杂质的效果，能够有效简化纯化步骤，提高纯化效率。

随着抗体药物在临床治疗中的广泛应用，开发高效的下游纯化工艺显得尤为重要。灵活运用各类层析模式及正确选择层析填料，将为抗体纯化提供更加经济高效的工艺路线。

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