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人干扰素诱导蛋白10 (IP-10) ELISA试剂盒使用指南 - 尊龙凯时

发布时间:2025-03-08   信息来源:尊龙凯时官方编辑

尊龙凯时的干扰素诱导蛋白10 (IP-10) Elisa试剂盒仅限于科学研究使用,禁止用于医学诊断。本文将为您介绍该试剂盒的检测原理及样品处理方法。

人干扰素诱导蛋白10 (IP-10) ELISA试剂盒使用指南 - 尊龙凯时

检测原理:本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。将标本、标准品及HRP标记的检测抗体依次加入预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,经过温育和彻底的洗涤后,用TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下变成蓝色,再经酸处理转变为黄色。颜色深浅与样品中adropin(AD)的浓度呈正相关,通过酶标仪在450nm波长下测量吸光度(OD值),进而计算样品的浓度。

样品收集、处理及保存方法:

  • 血清:使用无热原和内毒素的试管,避免任何细胞刺激,血液收集后以3000转离心10分钟迅速分离血清和红细胞。
  • 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂,进行3000转离心30分钟后取上清。
  • 细胞上清液:在3000转离心10分钟后去除颗粒和聚合物。
  • 组织匀浆:将组织用适量生理盐水捣碎,3000转离心10分钟后取上清。
  • 保存:如未能及时检测,建议将样本按一次用量分装,冷冻于-20℃,避免反复冻融,使用前在室温解冻并确保样品充分均匀。

操作注意事项:请务必准备充足的实验耗材,标准品浓度依次为0、25、50、100、200、400pg/mL,做好实验环境的控制。

洗涤缓冲液的准备:将20×洗涤缓冲液以1:20的比例用蒸馏水稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

结果判断:在实验结束后,应在Excel中绘制标准曲线,将标准品浓度作为横坐标,对应的OD值作为纵坐标,形成线性回归曲线,并根据曲线方程计算样本浓度值。

通过以上步骤,您能够高效完成尊龙凯时的IP-10 Elisa试剂盒的操作,并获得准确的实验结果。请遵循操作指南,确保实验的科学性和数据的可靠性。