尊龙凯时的犬传染性肝炎病毒(ICHV) ELISA试剂盒仅限于科学研究,不得用于医学诊断。以下是该试剂盒的使用说明及检测原理。
检测原理
本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。操作时,将标本、标准品和HRP标记的检测抗体依次加入预先包被的adropin(AD)抗体微孔中,经过温育后彻底洗涤。通过底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色,并在酸性环境中转化为最终的黄色。颜色深浅与样品中的adropin(AD)浓度呈正相关,随后在450nm波长下利用酶标仪测定吸光度(OD值),进而计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用无热原和内毒素的试管,避免操作中任何细胞刺激,收集血液后以3000转离心10分钟,迅速小心地分离血清和红细胞。
2. 血浆:采用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂。3000转离心30分钟后取上清。
3. 细胞上清液:在3000转离心10分钟后去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合捣碎,再以3000转离心10分钟获取上清。
5. 保存:若未及时检测样本,请按一次用量分装,并在-20℃条件下冻存,避免反复冻融。使用前在室温下解冻,确保样品均匀并充分解冻。
自备物品与操作注意事项
本试剂盒包含标准品(S0-S5),其浓度依次为0、25、50、100、200、400pg/mL。准备20×洗涤缓冲液时需以蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
结果判断
为了绘制标准曲线,可在Excel工作表中以标准品浓度作为横坐标,对应的OD值为纵坐标,绘制标准品线性回归曲线,并根据曲线方程计算各样本浓度值。
请注意,该试剂盒的相关信息和性能只是基础知识,详尽的操作规程和科学研究方法应遵循相关的实验规范。
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