中文

English

尊龙凯时RIN-14B大鼠胰岛素瘤细胞培养指南

发布时间:2025-02-07   信息来源:尊龙凯时官方编辑

尊龙凯时提供的RIN-14B大鼠胰岛素瘤细胞培养说明书涵盖了细胞的培养条件、处理步骤和售后服务条款,确保您在研究过程中获取最佳实验效果。

尊龙凯时RIN-14B大鼠胰岛素瘤细胞培养指南

一、细胞培养条件

细胞名称:RIN-14B大鼠胰岛素瘤细胞
生长特性:贴壁生长
冻存条件:使用无血清冻存液(货号:C7001)
培养体系:1640 + 10% FBS + 1% 双抗
传代方法:建议进行1:2的传代,传代后每两天更换培养液。

备注:使用无菌离心管收集培养基以进行不同状态的对比培养。如果对比结果不理想,建议直接选购我们的完全培养基,以确保实验顺利进行。

二、细胞处理

收到细胞后,应将其培养至良好状态,再灌满完全培养液并封好瓶口,这是运输细胞的最佳方法。在处理前,用75%酒精对细胞瓶进行消毒,随后放入37℃、5% CO2的培养箱静置3-4小时以稳定细胞状态。在显微镜下观察细胞生长情况,并拍照记录不同倍数的细胞图像,以便提供售后依据。

三、细胞培养步骤

a. 细胞传代

若细胞未达到80%的汇合度,需将培养液收集至离心管,保持5ml完全培养基并放入37℃、5% CO2孵箱中继续培养;如密度超过80%,请按以下步骤进行传代:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁的PBS冲洗细胞1-2次。
2. 加入1-2ml的消化液(0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA),在37℃下消化1-2分钟,观察细胞状态。当细胞大部分变圆并脱落后,快速加入5ml以上完全培养基以终止消化。
3. 轻轻吹打使细胞脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,在1000rpm下离心5分钟,弃去上清,加1-2ml的完全培养基重悬。
4. 按1:2的比例进行分瓶传代(两个T25瓶),补充新鲜完全培养基至5-8ml/瓶,最后放入37℃、5% CO2的细胞培养箱中培养。

b. 细胞冻存

1. 当细胞覆盖培养瓶的80%时,弃去培养液并用PBS冲洗一次。
2. 添加约1ml的0.25%胰蛋白酶消化液,轻轻观察,待细胞变圆后加入5ml完全培养基终止消化,再轻打使其脱落,将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5分钟。
3. 弃去上清后,将细胞沉淀与1ml的尊龙凯时无血清冻存液(货号:C7001)混匀,并加入冻存管中。
4. 将冻存细胞直接放入-80℃冰箱,若需转入液氮罐,须在-80℃下存放24小时后再转入。

c. 细胞复苏

1. 从液氮中取出冻存管,快速放入37℃水浴解冻,直至无结晶,擦拭管外壁。
2. 将冻存管中的细胞转移至含5ml完全培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5分钟。
3. 弃去上清,使用5ml完全培养基重新悬浮细胞,并接种至T25培养瓶,放于37℃、5% CO2培养箱中。
4. 次日更换新鲜完全培养基继续培养。

四、注意事项

细胞在运输中可能因贴壁不牢而脱落,请注意采取相应措施。建议收集所有培养液至离心管中,1000rpm离心5分钟,收集上清进行对比培养,沉淀后加入胰酶消化,轻打后重悬,再离心,补充完全培养基重悬。然后按1:2比例进行传代培养。

五、售后条款

1. 可重发的情况

如细胞在运输中出现丢失、破损或培养液漏出,均可重发。细胞污染需在收到48小时内提供实验结果,经核实后可重发。若常温发货的细胞静置后存活率低于要求(需提供照片),或退回细胞在特定条件下出现污染,也可重发。细胞活性问题需在7天内提出并经过验证。

2. 不予重发的情况

如因客户操作不当或使用非推荐的培养体系导致细胞状态不良,皆不予重发。同样,在收到后48小时内未告知的问题,及进行其它处理的细胞也不予重发。

请务必遵循以上操作规范,从而确保您的实验顺利进行。对于进一步的支持和咨询,请随时与尊龙凯时联系。